Кетоновые тела в моче. Клинико-диагностическое значение

Кетоновые тела в моче. Методы определения.

К кетоновым телам относятся ацетон, ацетоуксусная кислота и бета-оксимаслянная кислота. Кетоновые тела в моче встречаются совместно, поэтому раздельное определение их клинического значения не имеет. В норме с мочой выделяется 20 — 50 мг кетоновых тел в сутки, которые не обнаруживаются обычными качественными реакциями, при повышении кетоновых тел в моче качественные реакции на них становятся положительными.

Кетоновые тела в моче. Клинико-диагностическое значение.

Принцип обнаружения кетоновых тел в моче. Нитропруссид натрия в щелочной среде реагирует с кетоновыми телами, образуя комплекс, окрашенный в розовато-сиреневый, сиреневый или фиолетовый цвет. Чувствительность проб около 50 мг/л кетоновых тел. Полуколичественную оценку результатов можно дать в интервале от 150 до 1500 мг/л.

К методам определения кетоновых тел в моче относятся:

· Проба Ланге

· Модифицированная проба Ротеры

· Проба Легаля

· Проба Лестраде

· Экспресс-тесты

Унифицированная проба Ланге
Принцип метода
Нитропруссид натрия в щелочной среде реагирует с кетоновыми телами (ацетоуксусной кислотой, β-оксимасляной кислотой и ацетоном) с образованием комплекса красно-фиолетового цвета.
Необходимые реактивы
1. Раствор натрия нитропруссида готовят из расчета 50 г/л перед употреблением.
2. Уксусная кислота концентрированная.
3. Аммиак водный (NH₄OH) — 25%-ный раствор.
Ход исследования
Исследуют мочу в первые 3 ч после мочеиспускания. В пробирку к 3—5 мл мочи приливают 5—10 капель растворa натрия нитропруссида и 0,5 мл уксусной кислоты, смешивают, а затем осторожно, по стенке пробирки, пипеткой наслаивают 2—3 мл водного раствора аммиака. Пробу считают положительной, если в течение 3 мин на границе сред образуется красно-фиолетовое кольцо.

Модифицированная проба Ротеры
Принцип тот же, что и в пробе Ланге.
Необходимые реактивы
1. Натрия нитропруссид, раствор из расчета 50 г/л готовят перед употреблением.
2. Аммония сульфат.
3. Аммиак водный (NH₄OH) — 25%-ный раствор.
Ход исследования
Приблизительно 200 мг сухого сульфата аммония, 5 капель мочи и 2 капли раствора натрия нитропруссида тщательно смешивают в пробирке, а затем на эту смесь осторожно наслаивают 10—15 капель раствора водного аммиака. При наличии кетоновых тел на границе раздела в течение 3—5 мин образуется красно-фиолетовое кольцо, интенсивность окраски которого позволяет ориентировочно судить о концентрации кетоновых тел в моче.
При незначительной концентрации кетоновых тел слабое кольцо может появиться на 8—10-й минуте.
Проба Легаля
Необходимые реактивы
1. Свежеприготовленный водный раствор нитропруссида натрия (5%).
2. 10—15%-ный раствор едкого натра.
3. Уксусная кислота ледяная.
Ход исследования
К 5—6 мл мочи прибавляют несколько капель водного раствора нитропруссида натрия и 0,5 мл раствора едкого натра. Получается красное окрашивание. Добавляют 0,5—1 мл ледяной уксусной кислоты. Если красный цвет исчезает, проба отрицательная, если сохраняется — положительная. Если получается слабо розовая окраска, то проба считается также положительной.

Метод с готовым набором для экспресс-анализа ацетона в моче
Принцип тот же, что и в предыдущих двух пробах.
Ход исследования
На полоску фильтрованной бумаги помещают таблетку, на которую пипеткой наносят 2 капли исследуемой мочи. Через 2 мин окраску таблетки сравнивают с цветной шкалой. Наличие ацетона вызывает фиолетовое окрашивание разной интенсивности; согласно шкале реакцию оценивают как слабоположительную, положительную и резко положительную.
Ряд фирм выпускает экспресс-тесты для определения кетоновых тел; определение с помощью таких тестов проводят строго по инструкции.

Ацетоуксусная кислота в стерильной моче стабильна до 8—10 дней, при бактериурии или большом количестве дрожжевого грибка может полностью исчезнуть в течение 24 ч. Около 20% ацетона при комнатной температуре исчезает за 24 ч, но сохраняется в холодильнике. Кетоновые тела могут исчезать из мочи и in vivo при бактериурии.

Приготовление реактива.

6 г нитропруссида натрия растворяют в 100 мл 30% уксусной кислоты.

Ход определения.

К 5 – 6 мл мочи прибавляют несколько капель реактива (до цвета чая) и наслаивают аммиак. В положительном случае на границе жидкостей появляется фиолетовое кольцо.